皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的無血清培養(yǎng)方法
writer：章培標(biāo)，侯立中，侯宜
keywords：角質(zhì)形成細(xì)胞；無血清培養(yǎng)；組織工程；人工皮膚
source：期刊
specific source：黑龍江醫(yī)藥, 2003,5：442-445
Issue time：2003年
[論文摘要] 目的：探索建立少量成年自體皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞體外無血清培養(yǎng)體系，為自體組織工程皮膚的構(gòu)建與移植奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。方法：無茵條件下，取2cm×2cm 兔耳皮膚組織塊，Dispase消化，分離真表皮，表皮以胰蛋白酶+EDTA 消化獲得角質(zhì)形成細(xì)胞，以含鈣和不舍鈣的角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)液(K-SFM)，按不同細(xì)胞密度接種于24孔板，觀察細(xì)胞生長狀況；免疫組化鑒定，MTT法測定不同血清濃度對角質(zhì)形成細(xì)胞增殖分化的影響。結(jié)果：在適當(dāng)?shù)腃a 濃度下，少量自體角質(zhì)形成細(xì)胞能夠在無血清培養(yǎng)液k—SFM 中培養(yǎng)擴(kuò)增，最多可傳4～6代。添加血清后可明顯加速細(xì)胞分化。結(jié)論：無血清培養(yǎng)體系適用于少量成年自體角質(zhì)形成細(xì)胞的體外連續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增，培養(yǎng)的細(xì)胞可用于自體組織工程皮膚的構(gòu)建。