基于小分子識別誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)超分子組裝及表面固定研究
項目類別：國家自然科學(xué)基金面上項目
項目編號：21374057
項目規(guī)模：75萬RMB
參與人員：全體研究生
起止日期：2014/01-2017/12
在零污染背景上固定蛋白質(zhì)具有重要應(yīng)用意義，但目前采用的化學(xué)/物理固定 方法過程復(fù)雜，其特異性和靈敏度不能滿足要求。本項目創(chuàng)新性地利用小分子（如 HEPES 和 TCEP）對溶菌酶特異性識別及相轉(zhuǎn)變的誘導(dǎo)作用，研究建立溶菌酶分子在零污染背景基材表 面的直接固定方法，解決在零污染背景上固定目標(biāo)蛋白質(zhì)分子的關(guān)鍵核心難題。通過在分子 水平上研究小分子對溶菌酶特異性識別和誘導(dǎo)其相轉(zhuǎn)變的微觀進程，以及相轉(zhuǎn)變產(chǎn)物與包括 零污染背景在內(nèi)的各種表面之間的相互作用，闡明直接固定方法的作用機理。在實現(xiàn)溶菌酶 相轉(zhuǎn)變產(chǎn)物與零污染背景穩(wěn)定結(jié)合的基礎(chǔ)之上，通過生物素標(biāo)記或溶菌酶與目標(biāo)蛋白質(zhì)偶 聯(lián)，研究建立一整套目標(biāo)生物分子在零污染背景上直接固定的科學(xué)方法。該科學(xué)方法的建立 擬完全摒棄傳統(tǒng)方法中對零污染背景進行重復(fù)活化和鈍化的繁瑣步驟，從而有效解決生物分 子表面固定中的關(guān)鍵問題，為從實際復(fù)雜體系中高靈敏度鉤釣靶向蛋白質(zhì)提供科學(xué)依據(jù)。