本發明涉及醫療制劑領域，更具體的涉及一種用于癌轉移淋巴結示蹤的熒光特異性納米氧化鐵雜化物分散液及其制備方法和用途；一種用于癌轉移淋巴結示蹤的熒光特異性納米氧化鐵雜化物分散液，包括葡聚糖衍生物、氧化鐵顆粒和水，所述葡聚糖衍生物與氧化鐵顆粒相結合形成納米氧化鐵雜化物，所述納米氧化鐵雜化物均勻分散在水中；所述納米氧化鐵雜化物由葡聚糖衍生物與鐵鹽通過共沉淀法制得；所述葡聚糖衍生物由5?氨基乙酰丙酸與氧化葡聚糖通過席夫堿反應制得。本發明制備出的熒光特異性納米氧化鐵雜化物分散液有望應用于胃腸癌轉移淋巴結評估，并可通過葡聚糖的功能衍生，偶聯抗腫瘤藥物，達到診療一體化的目的。